簡要描述:NEB可提供210多種內(nèi)切酶,其中有130多種內(nèi)切酶為重組酶??寺〖爸亟M技術(shù)的運(yùn)用,使NEB能在提高內(nèi)切酶的純度及品質(zhì)的同時(shí),極大地削減生產(chǎn)費(fèi)用,從而為用戶提供價(jià)格更合理、品質(zhì)更優(yōu)良的產(chǎn)品上海騰騫生物atwz.cn, ,
NEB可提供210多種內(nèi)切酶,其中有130多種內(nèi)切酶為重組酶??寺〖爸亟M技術(shù)的運(yùn)用,使NEB能在提高內(nèi)切酶的純度及品質(zhì)的同時(shí),極大地削減生產(chǎn)費(fèi)用,從而為用戶提供價(jià)格更合理、品質(zhì)更優(yōu)良的產(chǎn)品
■ 高效連接粘性末端和平末端
■ T/A 克隆
■ dsDNA 切刻修復(fù)
■ 構(gòu)建高豐度克隆文庫
■ RNA 和 DNA 的連接
該酶催化雙鏈 DNA 或 RNA 上相鄰的 5?-磷酸末端和 3?-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化平齊末端或粘性末端之間的連接,還可以修復(fù)雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切刻。
純化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。
1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,10 mM DTT,1 mM ATP]。推薦 DNA 5? 末端濃度為 0.1-1.0 μM,16℃ 溫育。
熱失活:65℃ 10 分鐘。
T4 DNA 連接酶經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè),確保該產(chǎn)品具有zui高的活性和純度。
1 單位指在 20 μl 1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液中,16℃ 反應(yīng)條件下,30 分鐘能使 50% 的經(jīng) HindⅢ 消化的λDNA 片段 [ 5? 端濃度為 0.12 μM(300 μg/ml)] 連接所需的酶量。
400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。
與 E. coli DNA 連接酶需要 NAD+ 作輔因子不同,T4 DNA 連接酶的輔因子是 ATP。
稀釋后的 T4 DNA 連接酶應(yīng)于 -20℃、50% 甘油貯存緩沖液(稀釋緩沖液 A,NEB #B8001)中保存。如稀釋后馬上使用,也可用 1X T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液稀釋。
只要在反應(yīng)體系中補(bǔ)加 1 mM ATP,連接反應(yīng)就可以在 NEB 提供的四種限制性內(nèi)切酶緩沖液或在
T4 DNA 多聚核苷酸激酶反應(yīng)緩沖液中進(jìn)行。
連接酶 | |||
NEB# | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單價(jià) |
M0202L | T4 DNA Ligase | 100,000 units | 3,029 |
M0202M | T4 DNA Ligase, high conc. | 100,000 units | 3,029 |
M0202S | T4 DNA Ligase | 20,000 units | 699 |
M0202T | T4 DNA Ligase, high conc. | 20,000 units | 699 |
M0202V | T4 DNA Ligase | 10,000 units | 349 |
M2200L | Quick Ligation Kit | 150 rxns | 4,569 |
M2200S | Quick Ligation Kit | 30 rxns | 1,009 |
M2200V | Quick Ligation Kit | 15 rxns | 509 |
M0367L | Blunt/TA Ligase Master Mix | 250 rxns | 4,569 |
M0367S | Blunt/TA Ligase Master Mix | 50 rxns | 1,149 |
M0370L | Instant Sticky-end Ligase Master Mix | 250 rxns | 4,569 |
M0370S | Instant Sticky-end Ligase Master Mix | 50 rxns | 1,149 |