植物培養(yǎng)基無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高,為較穩(wěn)定的平衡溶液,在配制、貯存、消毒等過(guò)程中,即使有些成分略有出入,也不致影響離子間的平衡。其養(yǎng)分的數(shù)量和比例較合適,可滿(mǎn)足植物的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,廣泛地用于植物的器官、花藥、細(xì)胞和原生質(zhì)體培養(yǎng),效果良好,它的液體培養(yǎng)基用于細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)能獲得明顯成功。是目前普遍使用的培養(yǎng)基。 植物培養(yǎng)基好比土壤,是組織培養(yǎng)中離體材料賴(lài)以生存和發(fā)展的基地。因此,在組織培養(yǎng)的各個(gè)環(huán)節(jié)中,應(yīng)著重掌握培養(yǎng)基,了解它的組成和配制方法。
①根據(jù)配方要求,用量筒或移液管從每種母液中分別取出所需的用量,放入同一燒杯中,并用粗天平稱(chēng)取蔗糖、瓊脂放在一邊備用。
②將①中稱(chēng)好的瓊脂加蒸餾水300~400毫升,加熱并不斷攪拌,直至煮沸溶解呈透明狀,再停止加熱。
③將①中所取的各種物質(zhì)(包括蔗糖),加入煮好的瓊脂中,再加水至1000毫升,攪拌均勻,配成培養(yǎng)基。
④用1N的氫氧化鈉或鹽酸,滴入③中的培養(yǎng)基里,每次只滴幾滴,滴后攪拌均勻,并用pH試紙測(cè)其pH值,直到將培養(yǎng)基的pH值調(diào)到5.8。
⑤將配好的培養(yǎng)基,用漏斗分裝到三角瓶(或試管)中,并用棉塞塞緊瓶口,瓶壁寫(xiě)上號(hào)碼。瓶中培養(yǎng)基的量約為容量的1/4或1/5。
培養(yǎng)基的成分比較復(fù)雜,為避免配制時(shí)忙亂而將一些成分漏掉,可以準(zhǔn)備一份配制培養(yǎng)基的成分單,將培養(yǎng)基的全部成分和用量填寫(xiě)清楚。配制時(shí),按表列內(nèi)容順序,按項(xiàng)按量稱(chēng)取,就不會(huì)出現(xiàn)差錯(cuò)。成分單的格式與內(nèi)容見(jiàn)表9-2。