植物培養(yǎng)基好比土壤,是組織培養(yǎng)中離體材料賴以生存和發(fā)展的基地。因此,在組織培養(yǎng)的各個環(huán)節(jié)中,應(yīng)著重掌握培養(yǎng)基,了解它的組成和配制方法。 植物培養(yǎng)基的成分是由無機營養(yǎng)物、碳源、維生素、生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和有機附加物等五類物質(zhì)組成。
1、無機營養(yǎng)物:
無機營養(yǎng)物主要由大量元素和微量元素兩部分組成,大量元素中,氮源通常有硝態(tài)氮或銨態(tài)氮,但在培養(yǎng)基中用硝態(tài)氮的較多,也有將硝態(tài)氮和銨態(tài)氮混合使用的;磷和硫則常用磷酸鹽和硫酸鹽來提供。鉀是培養(yǎng)基中主要的陽離子,在近代的培養(yǎng)基中,其數(shù)量有逐漸提高的趨勢。鈣、鈉、鎂的需要則較少。培養(yǎng)基所需的鈉和氯化物,由鈣鹽、磷酸鹽或微量營養(yǎng)物提供。微量元素包括碘、錳、鋅、鉬、銅、鈷和鐵。培養(yǎng)基中的鐵離子,大多以螯合鐵的形式存在,即FeSO4與Na2-EDTA(螯合劑)的混合。
2、碳源:
培養(yǎng)的植物組織或細胞,它們的光合作用較弱。因此,需要在培養(yǎng)基中附加一些碳水化合物以供需要。培養(yǎng)基中的碳水化合物通常是蔗糖。蔗糖除作為培養(yǎng)基內(nèi)的碳源和能源外,對維持培養(yǎng)基的滲透壓也起重要作用。
3、維生素:
在培養(yǎng)基中加入維生素,常有利于外植體的發(fā)育。培養(yǎng)基中的維生素屬于B族維生素,其中效果醉佳的有維生素B1、維生素B6、生物素、泛酸鈣和肌醇等。
4、有機附加物:
包括人工合成或天然的有機附加物。醉常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各種氨基酸等。另外,瓊脂也醉常用的有機附加物,它主要是作為培養(yǎng)基的支持物,使培養(yǎng)基呈固體狀態(tài),以利于各種外植體的培養(yǎng)。
5、生長調(diào)節(jié)物質(zhì):
常用的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)大致包括以下三類:
(1)植物生長素類。如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)。
(2)細胞分裂素。如玉米素(Zt)、6-芐基嘌呤(6-BA或BAP)和激動素(Kt)。
(3)赤霉素。組織培養(yǎng)中使用的赤霉素只有一種,即赤霉酸(GA3)。