你可知內(nèi)切酶分為哪幾種類型呢?
發(fā)布日期:2021-09-24 瀏覽次數(shù):2402
內(nèi)切酶,即限制性核酸內(nèi)切酶。亦稱限制性核酸酶。它是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶,只對脫氧核糖核酸內(nèi)一定堿基序列中某特一定位置發(fā)生作用,把這位置的鏈切開。通過內(nèi)切酶可以把某一個遺傳基因切下來,若再連在別的細(xì)胞的遺傳基因上,便可使這細(xì)胞具有新的遺傳特性。內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)和采用,使基因工程成為可能。
第一類內(nèi)切酶能識別專一的核苷酸順序,并在識別點附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒有專一性,是隨機的。這類限制性內(nèi)切酶在DNA重組技術(shù)或基因工程中沒有多大用處,無法用于分析DNA結(jié)構(gòu)或克隆基因。這類酶如EcoB、EcoK等。
第二類內(nèi)切酶能識別專一的核苷酸順序,并在該順序內(nèi)的固定位置上切割雙鏈。由于這類限制性內(nèi)切酶的識別和切割的核苷酸都是專一的。所以總能得到同樣核苷酸順序的DNA片段,并能構(gòu)建來自不同基因組的DNA片段,形成雜合DNA分子。因此,這種限制性內(nèi)切酶是DNA重組技術(shù)中常用的工具酶之一。這種酶識別的專一核苷酸順序最常見的是4個或6個核苷酸,少數(shù)也有識別5個核苷酸以及7個、9個、10個和11個核苷酸的。如果識別位置在DNA分子中分布是隨機的,則識別4個核苷酸的限制性內(nèi)切酶每隔46(4096)個核苷酸就有一個切點。人的單倍體基因組據(jù)估計為3×199核苷酸,識別4個核苷酸的限制性內(nèi)切酶的切點將有(3×109/2.5×102)約107個切點,也就是可被這種酶切成107片段,識別6個核苷酸的限制性內(nèi)切酶也將有(3×109/4×103)約106個切點。