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磁珠全血基因DNA提取試劑盒操作和儲(chǔ)存的注意事項(xiàng)

  • 發(fā)布日期:2017-12-09      瀏覽次數(shù):2932
    • 磁珠全血基因DNA提取試劑盒根據(jù)全血特點(diǎn)采用幾個(gè)快速步驟提取基因組DNA,首先紅細(xì)胞裂解液裂解去除不含DNA的紅細(xì)胞,細(xì)胞核裂解液裂解白細(xì)胞釋放出基因組DNA,然后蛋白沉淀液選擇性沉淀去除蛋白,zui后純凈的基因組DNA通過(guò)異丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液,操作步驟簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)成本低,產(chǎn)量高,純度好,適合各種下游實(shí)驗(yàn)。
      磁珠全血基因DNA提取試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn):
      1.從十幾個(gè)配方中優(yōu)選出的紅細(xì)胞裂解液配方,裂解快速*。
      2.不需要使用有毒的苯酚等試劑。
      3.快速,簡(jiǎn)捷,單個(gè)樣品操作一般可在60分鐘內(nèi)完成。
      4.結(jié)果穩(wěn)定,產(chǎn)量高(典型的產(chǎn)量3ml全血可提取出50-150µg),OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7——1.9,長(zhǎng)度可達(dá)50Kb-150kb,可直接用于構(gòu)建文庫(kù)、PCR、Southern-blot和各種酶切反應(yīng)。
      磁珠全血基因DNA提取試劑盒注意事項(xiàng):
      1.所有的離心步驟均在室溫完成,使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到2500 x g, 4000rpm以上,并配備容納15ml離心管轉(zhuǎn)頭的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī)。
      2.如果實(shí)驗(yàn)室有50ml轉(zhuǎn)頭的臺(tái)式或立式離心機(jī),建議采用PP材質(zhì),可高溫高壓滅菌,50ml直口圓底離心管,不用擰螺旋蓋,方便開蓋,在本實(shí)驗(yàn)中,直口圓底離心管方便清洗,經(jīng)過(guò)多次漂洗消毒滅菌,可重復(fù)使用,降低實(shí)驗(yàn)成本。
      3.用戶需自備異丙醇和70%乙醇。
      4.典型的產(chǎn)量3ml全血可提取出50-150µg 基因組DNA(不同樣品尤其疾病樣品中白細(xì)胞數(shù)量差異可能非常大,因此產(chǎn)量的個(gè)體差異也可能非常大)。
      5.溶液型全血基因組DNA提取方法,可以很容易的按照比例擴(kuò)大或者縮小每次處理的全血量(100µl-20ml),需要具體產(chǎn)品操作說(shuō)明,請(qǐng)索取不同處理量的操作手冊(cè)。
      6.磁珠全血基因DNA提取試劑盒可運(yùn)用于多種抗凝劑的全血,如EDTA、檸檬酸、肝素抗凝血。其中由于肝素抗凝血的白細(xì)胞沉淀團(tuán)很難打散重懸,影響裂解效果,建議選用非肝素的抗凝劑收集血液標(biāo)本。
      7.為了*效果,使用新鮮血液標(biāo)本或者4℃存放小于3天的標(biāo)本,不要使用反復(fù)凍融超過(guò)3次的標(biāo)本,否則會(huì)嚴(yán)重降低產(chǎn)量。
      磁珠全血基因DNA提取試劑盒適用于快速提取各種動(dòng)物全血基因組DNA。
      磁珠全血基因DNA提取試劑盒儲(chǔ)存事項(xiàng):
      1.環(huán)境溫度低時(shí)細(xì)胞核裂解液中某些去污劑成份會(huì)析出出現(xiàn)渾濁或者沉淀,可在37℃水浴加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清,不要?jiǎng)×覔u晃,以免形成過(guò)量的泡沫。
      2.蛋白沉淀液可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在37℃水浴幾分鐘幫助重新溶解,如果不能*溶解,也不影響使用效果,直接取用上層溶液即可。
      3.避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。